英文名稱 ：Calprotectin ELISA KIT（stool）

【預期用途】

本產品僅供科研使用 。糞便鈣衛蛋白酶聯免疫吸附分析試劑盒用於定量測定人糞便中鈣衛蛋白（MRP 8/14）的含量 。

【概要說明】

鈣衛蛋白又叫MRP8/14 ，L1 ，(p8,14) ，p34 。

構成鈣衛蛋白異聚體的兩種蛋白名稱 ：

S100A8 ，鈣粒蛋白A ，MRP8（移動抑製因子相關蛋白8型） ，CP-10（小鼠） ；

S100A9 ，鈣粒蛋白B ，MRP14（移動抑製因子相關蛋白14型） 。

鈣衛蛋白是一種鈣結合蛋白 ，主要由嗜中性粒細胞和單核細胞分泌 。糞便中的鈣衛蛋白是腫瘤性和炎症性腸胃疾病的標誌物。

由於很難區分腸易激綜合征和慢性腸炎疾病 ，因此要經常對病人進行結腸窺鏡檢查 。而鈣衛蛋白檢測能夠很好區分這兩種疾病 。糞便中鈣衛蛋白水平與克羅恩病和潰瘍性結腸炎的組織學、內窺鏡檢查具有顯著一致性 ，也和腸炎疾病的檢測金標準——糞便中銦-111標記的嗜中性粒細胞分泌物具有極高相關性 。由於檢測銦-111標記的嗜中性粒細胞的成本較高（住院治療 、同位素分析和處理）且病人暴露於放射性環境下 ，不建議對兒童和孕婦采用該方法 。

鈣衛蛋白水平提高預示著相應疾病的複發 ，是一個比CRP,ESR,HB更好的標誌物 。將上述標誌物與結腸直腸癌的標準便潛血檢測比較後發現 ，糞便中鈣衛蛋白檢測在診斷上更具優勢 ：如果糞便中鈣衛蛋白水平很低 ，極大程度上說明未患有器官性腸道疾病 。

檢測糞便中鈣衛蛋白水平有助於 ：

l  急性炎症的標誌物

l  評估腸胃炎症程度

l  監測克羅恩病 、潰瘍性結腸炎或息肉摘除後病人狀況

進行糞便檢查時區分腸炎疾病（克羅恩病 、潰瘍性結腸炎）和腸易激綜合症 。

【樣本要求】

1．采用糞便樣本 。

盡管糞便中的鈣衛蛋白保持穩定約6天 ，仍然建議將糞便樣本於2-8°C下保存且不超過48小時 。-20°C下可長期保存 。允許將樣本緩慢解凍（於2-8°C下過夜） ，分析前平衡至室溫 。

2．樣本提取

1）建議使用糞便樣本提取試劑盒 ，取100 mg糞便樣本溶於5ml提取緩衝液中 。

緩衝液體積恒量 ：5ml

稀釋因子 ：1 ：50

2）或選擇人工方法 ，稱重80-120mg糞便樣本 ，記下確切重量 。

a. 向樣本加入5ml緩衝液 。

緩衝液體積恒量 ：5ml

稀釋因子取決於樣本量 ，使用多少樣本量應考慮後麵的計算 。請參考下表中正確的稀釋因子 ：

b. 每個樣本所需緩衝液體積取決於樣本量（見下表） 。稀釋因子保持1 ：50不變 。

因此 ，對於所有樣本來說 ，相同的稀釋因子可應用於後麵的結果評估 。

混合糞便樣本和緩衝液 ，於渦旋混合器上振蕩至少30秒（取決於糞便硬度） 。

移取1ml糞便懸浮液到EP管內 ，13000g條件下離心5分鍾 。

3．樣本稀釋

取樣本提取上清液 ，用衝洗緩衝液以1 ：50比例稀釋 。例如 ：20ml上清液（稀釋1）+980ml衝洗液=1 ：50（稀釋2） 。移取100ml稀釋2的上清液用於檢測分析 。

(Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681)

【參考文獻】

1.     Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681

2.     Fagerhol et al. (2000) The Lancet 356:1783-1784

3.     Tibble et al. (2000) Gut 47:506-513

4.     Tibble et al. (2000) Gastro 119:15-22