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    腎上腺皮質酮檢測試劑盒(酶聯免疫法)

    英文名稱 :Corticosterone ELA

       生產廠商 :艾狄斯

    【簡介】

    本產品僅供科研使用 。

    IDS公司的腎上腺皮質酮酶免試劑盒是用競爭法酶聯免疫分析法(EIA)定量檢測大 、小鼠血清/血漿中的皮質酮


    【概要說明】

    腎上腺皮質酮(4-孕烯醇酮-11,12-二醇-3,20-二酮)是由腎上腺皮質分泌的 ,在大 、小鼠體內發現的主要糖皮質激素 。循環中大部分腎上腺皮質酮由皮質類固醇結合球蛋白運載 。大 、小鼠的皮質酮水平與人類皮質中的數量狀態相類似 ,可作為腎上腺功能的指標使用 。尊龍凱時能從促腎上腺皮質激素的釋放(促進分泌)和通過地賽米鬆或垂體切除術(抑製分泌)中觀察其反應 。在循環中 ,壓力也同樣扮演了一個非常重要的角色 。壓力情形將導致腎上腺皮質酮水平迅速增加 ,這些壓力情形包括溫度的改變 、實驗的刺激或非常規事件的出現 。

     

    【方法描述】

    IDS公司的腎上腺皮質酮酶免試劑盒采用競爭法酶聯免疫分析法 ,該方法利用多克隆抗體包被至聚苯乙烯微量板內表層 。定標 、質控和稀釋樣本與標上腎上腺皮質酮的酶(辣根過氧化物酶)在包被抗體微量孔中2-8°C下一同孵育過夜 。清洗微量孔並用發色底物(TMB)使其生成顏色 。停止反應混合物並在微量板讀數儀上讀取其吸光度 ,顏色的強度與樣本中腎上腺皮質酮的的濃度成反比 。


    【樣本收集和保存】

    該檢測應使用血清或血漿樣本(EDTA 、肝素 、檸檬酸鹽) 。樣本在收集後應立即進行離心分離 。如需長期保存 ,應儲存在-20°C 。避免反複凍溶樣本 。


    操作簡介


    樣本稀釋

    30 μL的樣本

    270 μL的樣本稀釋液SAMPDIL 。旋渦混勻

     

    檢測

    加入100 μL標準液CAL  ,質控液CTRL或稀釋後的樣本至抗體包被的微量板中MICROPLAT .

    加入100 μL的酶結合物溶液

    孵育 :16-24小時@ 2-8°C

    洗板

    加入200 μL TMB底物SUBS

    孵育 :30分鍾 @ 18-25°C.

     加入100 μL終止液HCL

                                                                         讀板 @ 405nm.



    參考文獻

    1.     Corker C.S. Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology : Steroid Assay by Protein Binding. E. Diczfalusy, ed., p 153 (1970).

    2.     Keith L. D., Winslow J. R. and Reynolds R. W. Steroids, 31: 523 (1978).

    3.     Shimizu K., Amagaya S. and Ogihara Y. : Analysis of Corticosterone in the serum of mice and rats, using high performance liquid chromatography. J. Chromatography, 272: 170

    4.      Vining R.F., James D. E., Bennett S. P. and Kraegen E. W. Steroids, 38: 297 (1981)

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