英文名稱 :RatTRAP Assay Kit
【預期用途】
本產品僅供科研使用 。
RatTRAPTM test是一種用來測定大鼠血樣中來源於破骨細胞的抗酒石酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的固相酶聯免疫活性測定 。
【概要說明】
TRAP是破骨細胞骨吸收中表達並被釋放進入血循環
。因此
,血清TRAP被認為是有效測定骨吸收速率的潛在標記物
。然而
,一些問題阻止了特異性TRAP分析的發展
,包括血清中一些其它酸性磷酸酶
,兩種TRACP的異構重組產物——5a和5b
,活躍或不活躍的TRAP分子及循環中一些碎片的幹擾
。
RatTRAP™分析方法是一個特異性檢測大鼠破骨細胞分泌到循環中的TRAP 5b
。並且
,RatTRAP™隻檢測剛進入循環之內有活性的TRAP分子
。該方法不會檢測到在循環中沒有活性的TRAP分子或碎片
。因此
,RatTRAP™分析方法能準確評估在樣本采集時的骨吸收速率的數量
。
【應用】
RatTRAP™分析能用於監測睾丸切除術和卵巢切除術後大鼠模型的骨吸收速率的改變
。然而,該分析方法的使用存在著一些限製
。尊龍凱時推薦在手術操作前提取血清樣本(日子0
,基準樣本
,非常重要)
,在手術操作後的1,2,4,7 和 14 天提取血清樣本
。在每個時間點都必須包括一個假設群體作為正常水平組
。尊龍凱時的結果出示血清TRAP 5b水平在睾丸切除術和卵巢切除術之後的幾天內快速上升, 然後在手術後2個星期又回重到正常的水平
。在那個時間點之後
,TRAP 5b水平不再高於正常值
。
【原理】
RatTRAP™使用一個高特異性的單克隆抗體是以重組巴氏病毒激發的RatTRAP作為抗原產生的
。在測試中
,抗體在包被有抗鼠IgG的單克隆抗體微量孔中孵育
。洗滌之後
,標準品
,質控品和血清樣本在微量孔孵育,並且測定TRAP 5b活性是在TRAP 5a失活而TRAP 5b高活性時的PH下
,利用發光底物酶顯色
。反應被終止
,反應混合物的吸光度在微量板讀數儀上讀取
,顏色的亮度與樣本中TRACP 5b的活性和數量成正比
。